ترانسفکشن سلول های بنیادی عصبی با ژن bdnf با استفاده از نانو سیستم حامل

چکیده: مقدمه: نانوذرات پارامگنتیک پوشیده شده با پلی -lلیزین، خاصیت مغناطیسی برای ترانسفکت ژن bdnf (فاکتور نوروتروفیک مشتق شده از مغز) را دارا می باشد. تاثیر مفید و پایه ای bdnf جلوگیری از مرگ سلول های عصبی در موارد آسیب های عصبی مختلف و بیماری های تحلیل برنده عصبی در مدل حیوانی می باشد. از آنجا که در ترانسفکت کردن سلول های بنیادی عصبی میزان ترانسفکشن وهمچنین غیر خطرناک و ایمن بودن از اهمیت بسزایی برخوردار است، در این تحقیق از حاملهای تشکیل شده از ذرات به جای حامل های غیر ویروسی استفاده شد و در شرایط in vitro ترانسفکت ژن bdnf در سلول های بنیادی عصبی (nscs) صورت گرفت. مواد و روش ها: با استفاده از کلرید اهن (iii) و (ii) و با نمک هیدروکسید آمونیوم نانوذرات spions توسط رسوب دهی شیمیایی آماده شد. خواص فیزیکی وشیمیائی spions با استفاده از میکروسکوپ tem، و اندازه ی ذرات با دستگاه زتا سایزر مورد بررسی قرار گرفت. کارایی ترانسفکشن این نانوکمپلکس spions-pll در غلظت های مختلف از ژنegfp ارزیابی شد. در روش ساب کلونینگ ژن (pro-bdnf) را به وکتور بیانی (psectagb) برده و سلول های عصبی بنیادی را توسط آن تراسفکت شد و سپس ترشح bdnf با استفاده از روش rt-pcr و وسترن بلات مورد انالیز قرار گرفت. نتایج: نتایج rt-pcr و روش الایزا نشان داد که سلول های ترانسفکت شده با استفاده از نانو سیستم در شرایط in vitro میزان قابل توجه ی از بیان و ترشح bdnf را دارند. که این سلول ها می توانند به طور گسترده ای در برنامه های بالینی و درمانی بیماری های بازسازی سلول های عصبی استفاده گردند. نتیجه گیری: نانو spions-pll جایگزین مناسبی جهت ترانسفکشن ژن با توجه به سهولت استفاده، اثر بیشتر و سمیت کمتر سلولی است. واژگان کلیدی: نانوذرات ((spion، ( pll)، (( bdnf، سلول های بنیادی عصبی